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引用本文：常高萍，林巧燕，张敏，等 . 红毛藻不同乙醇浓度提取物的生物活性及其成分分析 [J]. 化学试剂 , 2023, 45(2): 98-105 . DOI: 10.13822/j.cnki.hxsj.2022.0718 投稿网址：https://hxsj.cbpt.cnki.net/

文章亮点


(相关资料图)

（1） 分析了红毛藻不同浓度乙醇提取物中总多酚、总黄酮、总生物碱含量与DPPH清除能力、胰脂肪酶、乙酰胆碱酯酶、酪氨酸酶抑制活性的相关性 ；

（2）基于LC-MS/MS技术鉴定了红毛藻乙醇提取物中的总多酚类物质；

（3）为红毛藻活性物质的研究及红毛藻在功能性食品、医药等领域的应用提供了理论依据和技术支持。

图文介绍

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实验部分

1.1主要仪器与试剂

1.2实验方法

1.2.1样品制备

1.2.2红毛藻提取物DPPH清除能力的测定

1.2.3红毛藻提取物酶抑制活性的测定

1.2.3.1酪氨酸酶抑制活性的测定[7]

1.2.3.2乙酰胆碱酯酶抑制活性的测定[8]

1.2.3.3胰脂肪酶抑制活性的测定

1.2.4红毛藻提取物化学成分的测定

1.2.4.1总多酚含量的测定

1.2.4.2总黄酮含量的测定

1.2.4.3总生物碱含量的测定

1.2.5红毛藻100%乙醇提取物中多酚类化合物的鉴定

1.3数据分析

基于迈维（武汉）生物技术有限公司自建 MVDB 数据库，根据二级谱信息进行物质定性，利用三重四极质谱的多反应检测模式 MRM 完成多酚物质定量，利用软件 Analyst 1.6.3 处理质谱数据。每个实验设定 3 组平行，利用 Excel 2016 软件进行数据分析和作图，实验结果采用 ` x ± SD 的形式表示，使用 SPSS 17.0 分析软件对数据进行单因素方差分析，采用 Duncan 检验来检验数据均值之间的显著差异。使用 GraphPad Prism 8.3.0 进行 Pearson相关性检验并分析作图。

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结果与讨论2.1红毛藻提取物DPPH清除能力分析

由于DPPH是一种相对稳定的自由基，它可以接受电子或氢原子而成为稳定的化合物分子，广泛用于自由基清除活性的研究[13]，本研究通过DPPH清除活性测定红毛藻提取物的抗氧化能力。图1为红毛藻不同乙醇浓度提取物对供氢猝灭活性物质DPPH的清除能力。

2.2红毛藻提取物酶抑制活性分析

红毛藻不同乙醇浓度提取物对酪氨酸酶、乙酰胆碱酯酶和胰脂肪酶的抑制活性如图2～4所示。

2.3红毛藻提取物成分分析

图 5 显示红毛藻不同乙醇浓度提取物总多酚含量的范围为（ 20.28 ～ 31.47 ） mg/g ，不同乙醇浓度提取物之间有显著性差异，红毛藻提取物中的总多酚的含量随着乙醇浓度的增大呈现先降低后增加的趋势，这一变化趋势与不同乙醇浓度提取物的 DPPH 清除力趋势基本相同。

2.4相关性分析

图 8 为红毛藻不同乙醇浓度提取物的化学成分与生物活性的相关性分析。

2.5红毛藻100%乙醇提取物中多酚类化合物的鉴定

图 9 表示采用 LC-MS/MS 技术对红毛藻 100% 乙醇提取物中的多酚类化合物进行定性的总离子色谱图。根据二级谱信息进行化合物定性，并与标准数据库进行比较。

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结论

红毛藻不同乙醇浓度提取物均具有DPPH清除能力，以及酪氨酸酶、胰脂肪酶、乙酰胆碱酯酶抑制活性，乙醇浓度不同，其提取物生物活性不同，总多酚、总黄酮、总生物碱含量不同。相关性分析表明，总多酚和总黄酮含量与酪氨酸酶抑制活性和DPPH清除能力均具有极显著相关性。LC-MS/MS检测结果显示红毛藻100%乙醇提取物中含有37种多酚类化合物，为红毛藻活性物质的研究及红毛藻在功能性食品、医药等领域的应用提供了理论支持。

关键词： 酪氨酸酶 生物活性 多酚类化合物